OOS(outofspecification,超限度、超規格)結果,是指產品質量指標測試中超出已經建立的可接受標準的單個或一系列結果。無菌產品的陽性結果、微生物限度試驗超出行動值或超過規格、內毒素試驗結果超標準等均為OOS結果《中國藥典》2015年版m和新版《藥品生產質量管理規范》(GMP)增加了OOS調查章節,對微生物實驗室00S結果的調查做出了較為詳細的闡述和實例分析,要求任何OOS結果必須按照書面規程進行完整的調查。因為只有確定了OOS結果產生的原因并判定其是否有效,進而才能制訂完善的預防和整改措施,以保證檢驗結果的準確性。因此,實驗室建立OOS調查處理程序,對OOS結果進行科學、及時、有效的調查分析處理是十分必要的微生物在自然環境中無處不在,并可能會隨檢驗人員、檢驗用器材以及檢品的包裝容器進入檢驗環境。因此,關于微生物檢驗中藥品的無菌檢査項目,新版藥典對其操作環境提出了更高要求,新版GMP也加強了對無菌操作環境空氣微生物、表面微生物以及人員手套和操作服表面微生物的監測頻率,并做出了明確規定。而對于無菌檢査OOS結果的調査,需核實的相關記錄和影響因素更為繁雜。基于它的復雜性,OOS結果的調查須追溯到實驗過程的每一個環節,而對于它的變異性,調查過程又需針對不同的OOS結果著重分析調查相應的不同環節。
對于微生物實驗室OOS的調查,局限于每個檢驗單位的技術水平和資源,同樣限于人類對微生物掌握的局限,不是每次的OOS調査都可以發現其根本原因,但通過此調査過程仍能夠幫助調查者找出超標結果發生的可能原因并進而采取糾正預防措施,基于風險分析,對相關批次產品做出最后處理決定'從而降低藥品質量風險,既是保證藥品質量的重要工作,又是質量體系持續改進的原動力。本文通過對4批無菌產品的無菌檢査實驗全過程的回顧性分析和調查,探索導致無菌實驗OOS結果的明確原因,以期建立微生物實驗室完善的OOS調査方案。
1、材料、儀器與試劑
全自動智能無菌集菌儀(上海秉越智能集菌儀zw-2008);一次性使用全封閉集菌培養器(上海秉越電子儀器有限公司);
顯微鏡;
全自動微生物鑒定儀;
酵母菌鑒定卡。
無菌檢查樣品為4個批號的注射用頭孢噻膀鈉。
2、方法與結果
2.1實驗方法
2.1.1藥品的無菌檢查
依照《中國藥典》2010年版_檢驗注射用頭孢噻肟鈉的無菌檢查項目。
2.1.2鏡檢及鑒定
取陽性樣本,劃線TSA平板培養24~48h,按照儀器及試劑的使用說明,對經過純化的微生物進行革蘭氏染色,確定微生物形態,然后根據形態選擇鑒定卡,使用全自動微生物鑒定儀Vitek2Compact進行鑒定。